DNA RNA蛋白質(zhì)提取試劑盒提供了一種從培養(yǎng)的細(xì)胞,動(dòng)物組織,全血和生物體液中同時(shí)純化基因組DNA,總RNA和總蛋白質(zhì)的有效方法。離液鹽用于裂解細(xì)胞并使DNA酶和RNase失活,從而使DNA結(jié)合到基因組DNA離心柱上。然后可以將流通物轉(zhuǎn)移到RNA Spin柱中進(jìn)行RNA結(jié)合。使用洗滌緩沖液有效去除污染物,然后在低鹽緩沖液中進(jìn)行純基因組DNA洗脫,并在無RNase的水中進(jìn)行純總RNA洗脫。
DNA / RNA純化可在25分鐘內(nèi)完成,而無需有機(jī)溶劑萃取或乙醇沉淀,蛋白質(zhì)純化可在50分鐘內(nèi)完成。純化的DNA大約20-30Kb,適合用于PCR或其他酶促反應(yīng),純化的RNA(包括miRNA)可用于RT-PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR,Northern印跡,引物延伸,mRNA選擇,以及cDNA合成。純化的蛋白質(zhì)可以直接在SDS-PAGE和隨后的蛋白質(zhì)印跡上進(jìn)行分析。
通過從1x106培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞中分離基因組DNA和總RNA,對(duì)批次進(jìn)行DNA RNA蛋白提取試劑盒的質(zhì)量測試。用紫外分光光度計(jì)對(duì)純化的DNA和總RNA進(jìn)行定量,并在1%瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳分析。通過在SDS-PAGE上分析的Bradford測定法定量純化的蛋白質(zhì)。
1.樣品:培養(yǎng)的細(xì)胞,動(dòng)物組織,全血和生物液體
2.形式:基因組DNA離心柱和總RNA離心柱。
3. 產(chǎn)量:從106HeLa細(xì)胞中獲得多達(dá)9ug的基因組DNA / 20ug的總RNA / 120ug的蛋白質(zhì)。
4.操作時(shí)間:25分鐘以內(nèi)
5.洗脫體積:基因組DNA洗脫體積為50 – 200ul,總RNA洗脫體積為25 – 50ul。
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